服务简介
背景: 亲和力成熟是单克隆抗体提升药效、降低免疫原性、提高成药性的常见改造策略之一。三优生物可提供亲和力改造、阻断活性改造、种属交叉活性改造以及成药性改造等系列亲和力成熟服务。
服务亮点
亲和活性极致提升
采用抗体高级结构模拟及多种突变策略，改造后的抗体亲和力可获数倍至百倍提升。
真核表达全面验证
采用哺乳动物细胞表达系统（CHO/HEK293），表达获得的重组蛋白接近天然构象，具有良好的生物学活性。辅以多维质控，抗体质量全面验证。
靶点类型不受限制
可进行不限靶点种类的亲和力成熟，对于个性化或高难度的改造需求可定制开发，代表性靶点：LAG3、IL-23、CD47、Claudin18.2等。
项目研发经验丰富
三优生物已完成200+抗体分子的改造工作，核心研发人员拥有十年以上从业经验，可根据项目需求进行亲和力的多样化改造。
技术工艺全面升级
针对不同改造分子制定多种个性化筛选策略，匹配一系列高通量、自动化筛选设备，可快速获得真核抗体蛋白。
4 周快速优质交付
单轮亲和力成熟仅需4 周，辅以严格质量标准体系，确保高效优质交付。
服务内容
服务特性
1. 多种建库策略
三优亲和力成熟服务集成多种建库策略，包括覆盖每个CDR区的单点组合突变抗、针对关键CDR区的多个氨基酸位点的连续突变及基于大容量天然抗体库的链置换等多种建库策略，将库容提升至数亿到数十亿。
策略1：覆盖6个CDR的每一个氨基酸位点的点突变抗体库
策略2：针对关键CDR进行多个氨基酸位点的连续突变抗体库
2. 多元化高通量筛选系统
2.1 高通量筛选系统
平台拥有高通量噬菌体展示工作流程的自动化解决方案，平台集成高通量筛选、高通量初筛、高通量构建、高通量表达等一体化高通量筛选系统，高效快速完成筛选，提高交付效率。
2.2 多种筛选策略
平台集成固相筛选、液相筛选、固液交叉筛选，细胞筛选、蛋白细胞交叉筛选等多种筛选方式，根据不同改造目标定制个性化筛选方案。
服务流程
案例展示
1. 抗体功能性验证
1.1 亲和力与功能活性双向提升
背景：抗体（Parental Ab）功能活性比对照抗体（Benchmark）好，但亲和活性仍有差距。
方法：三优生物采用单、双点饱和突变建库策略，结合针对性提高亲和力的淘洗策略，以获得亲和活性与对照抗体(Benchmark)相当的优选抗体。
结果：如Fig. 1A 所示，改造前抗体(Parental Ab)通过亲和力成熟，亲和力提升了5倍，与对照抗体(Benchmark) 相当；如 Fig. 1B 所示，改造后优选抗体（Engineered Ab）功能活性比对照抗体（Benchmark）提高了350倍，亲和力和功能活性双向提升，亲和力成熟改造成功。
Fig. 1A Binding affinity
Fig. 1B Functional activity
1.2 亲和力与阻断双向提升
背景：抗体（Parental Ab）的亲和力和阻断效果显著弱于对照抗体（Benchmark），需要提升至接近或优于对照抗体（Benchmark）的水平。
方法：三优生物通过单点组合突变建库对抗体（Parental Ab）进行亲和力成熟改造，进行3轮固相和液相海选，获得改造后抗体（Engineered Ab）。
结果：如Fig. 2 所示，改造后抗体（Engineered Ab）的结合活性与阻断活性均与对照抗体（Benchmark）相当，比抗体（Parental Ab） 有了明显的提升。
Fig. 2A 亲和力排序
Fig. 2B 阻断排序
1.3 物种交叉活性改善
背景：抗体（Parental Ab）与人源抗原有较好的亲和力，但是几乎不结合鼠源抗原，人鼠交叉活性弱。
方法：三优生物通过单点和双点组合建库，采用确保人源抗原亲和活性不变，针对鼠源抗原进行3轮次的淘选，以获得良好人鼠交叉活性的抗体。
结果：改造后抗体（Engineered Ab）的人鼠交叉活性检测结果如Fig. 3 所示，在保持人源抗原亲和活性的同时，鼠源抗原EC50值从695.921 nM提升至5.823 nM, 提升了近120倍，人鼠交叉活性改造成功。
Fig. 3A 人源抗原亲和活性检测
Fig. 3B 鼠源抗原亲和活性检测
1.4 pH依赖活性显著
背景：抗体（Parental Ab）在pH=6.0和pH=7.2等不同pH环境下的结合特性没有存在显著差异。
方法：三优生物通过单点和双点组合建库，采用确保在pH=7.2条件下亲和活性不变，针对pH=6.0条件进行3轮次淘选，以获得不同pH条件下均有较好结合活性的抗体。
结果：改造后抗体（Engineered Ab）在不同pH环境下亲和活性检测结果如Fig. 4 所示，在pH=7.2条件下亲和活性与抗体（Parental Ab）相当，在pH=6.0时比抗体（Parental Ab）有了显著降低，pH依赖型抗体改造成功。
Fig. 4 pH依赖活性检测
2. 抗体动力学检测
2.1 Fortebio检测
背景：抗体（Parental Ab）的解离速率（kd）较快，体内药代结果不理想。
方法：三优生物通过多点组合突变建库，进行4轮针对off-rate海选，对改造后的抗体进行Fortebio亲和动力学检测，以获得低解离速率的抗体分子。
结果：改造后抗体（Engineered Ab）的亲和动力学检测结果如Fig. 5 所示，抗体（Parental Ab）改造后抗体（Engineered Ab） KD值由6.53E-8 M提升至2.37E-10 M，提高了276倍。
Fig. 5A Parental Ab
Fig. 5B Engineered Ab
2.2 Biacore检测
背景：抗体（Parental Ab）已完成功能筛选，各方面数据都与对照抗体（Benchmark）活性相当，需进一步提升抗体KD值至对照抗体（Benchmark）的10倍。
方法：三优生物通过单点组合和双点连续突变建库，经3轮淘选，对改造后的抗体进行Biacore亲和动力学检测，最终确定改造后抗体（Engineered Ab）。
结果：如Fig. 6A 所示，抗体（Parental Ab）与对照抗体（Benchmark）活性相当，改造后抗体（Engineered Ab）的KD值由1.98E-9 M提升至1.01E-10 M，提高了近20倍。
Fig. 6A Parental Ab
Fig. 6B Engineered Ab
Fig. 6C Benchmark
科研成果
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